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Detecção das concentrações de NADH por técnicas voltaminétricas

Resumo do projeto

A respiração celular é necessária para produzir energia e manter o funcionamento do nosso corpo por meio da produção de ATP, O NADH (Nicotinamida Adenina Dinucleotídeo) é uma coenzima encontrada em todas as células. Sua principal função é a produção de energia celular para o organismo. Quanto mais NADH uma célula possui, mais energia ela poderá produzir. O NADH é derivado da niacina (vitamina B3), ele tem um papel ativo na produção de neurotransmissores como a acetilcolina, noradrenalina e dopamina, cuja deficiência está associada aos sintomas ligados às doenças de Parkinson e Alzheimer. NADH (Nicotinamida Adenina Dinucleotídeo) é indicado no combate ao envelhecimento precoce, doenças degenerativas, arteriosclerose, disfunções cardíacas, Alzheimer e Parkinson. Usado na prevenção do câncer, insônia, danos e alterações celulares causadas por exposição a radiação, luz, ultravioleta, ozônio e toxinas químicas. É utilizada por atletas pelo aumento da energia celular (ATP) e consequentemente aumento da energia para a prática de exercícios. Para os atletas, o NADH foi mostrado para melhorar significativamente o desempenho, estimular a capacidade mental, atenção e capacidade de reagir ao estresse.Dentre as técnicas eletroquímicas, podemos considerar a voltametria cíclica (VC) como a mais utilizada para a aquisição de informações qualitativas sobre reações eletroquímicas. Nesse caso utilizaremos ela para a exploração e caracterização dos procedimentos que serão utilizados na quantificação de NADH em cápsulas vendidas comercialmente. A quantificação será conduzida com uma técnica mais sensível: a voltametria de pulso diferencial (VPD). O objetivo do presente estudo é verificar se as técnicas voltamétricas são eficientes para determinar as concentrações de NADH em cápsulas vendidas comercialmente. O eletrodo de pasta de carbono modificado em solução de guanina (EPC-GUA), descrito por da Silva e colaboradores em 2003, foi preparado por meio da aplicação de 1,1 V durante 12 minutos a um eletrodo de pasta de carbono numa solução contendo 0,5 mmol L-1 de guanina, 0,1 mol L-1 de tampão PIPES (piperazina-1,4-bis(ácido 2-etanossulfônico)) e 0,2 mol L-1 de nitrato de sódio. O PIPES é o agente tamponante da solução, que foi preparada em pH 7,0. A solução foi mantida sob agitação ao longo da aplicação de potencial.Após o processo descrito acima, foi feita limpeza eletroquímica do eletrodo: em solução tampão fosfato pH 7,4 foram medidos voltamogramas cíclicos na janela de trabalho em sequência até o desaparecimento de qualquer sinal voltamétrico associado processos de oxirredução de moléculas adsorvidas na superfície do eletrodo. O eletrodo de pasta de carbono modificado em solução de adenosina (EPC-ADO) foi preparado de maneira semelhante àquela descrita por de los Santos Álvarez e colaboradores em 2000. Foram aplicados 1,3 V durante 12 minutos a um eletrodo de pasta de carbono numa solução contendo 0,5 mmol L-1 de adenosina e 0,1 mol L-1 de tampão fosfato pH 7,4. Após a modificação do eletrodo, foi feita limpeza eletroquímica da superfície da mesma forma descrita para o eletrodo modificado em solução de guanina. As medidas em solução contendo NADH foram feitas com voltametria de pulso diferencial. A janela de trabalho utilizada para as medidas foi de 0,25 V a 0,7 V com EPC-GUA e -0,2 V a 0,4 V com EPC-ADO. Foram feitas medidas em diferentes em soluções contendo diferentes concentrações de NADH de modo que, com os valores de corrente de pico obtidos, foram construídas curvas analíticas, as quais foram utilizadas para comparar os métodos analíticos com relação à sensibilidade e viabilidade prática. Concluímos que a voltametria é um método simples e de baixo custo para detecção de NADH em amostras comerciais.

Alunos

Gabriela Batista Batistela
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Orientadores

Clarissa Scolastici Basso

Instituição

Colégio Degraus
Jundiaí /
  Jundiaí –  
  SP –
  Brazil

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